Purification des chloroplastes isolés
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Comment purifier des chloroplastes isolés ?
Fraction brute de chloroplastes en contraste de phase.
Les chloroplastes intacts (pourvus de leur enveloppe) sont réfringents. Les chloroplastes "cassés" (sans enveloppe) apparaissent en sombre.
Protocole de purification de chloroplastes.
Les chloroplastes sont centrifugés dans un milieu réalisé avec des couches de concentrations différentes en saccharose. Les chloroplastes intacts se séparent des chloroplastes "cassés" grâce à leur densité légèrement supérieure.
Fraction de chloroplastes cassés.
Ces chloroplastes ne possèdent pas d'enveloppe et leur stroma est en contact direct avec le milieu.
Fraction purifiée de chloroplastes intacts.
On reconnait l'ensemble des structures des chloroplastes "in situ" (enveloppe, thylacoïdes, stroma).